저자(한글) |
GUO, Zhe,XIANG, Bang-de,JIANG, Jing-hang,ZHANG, Jun,ZHONG, Yan-ping,SU, Jie,LI, Le-qun |
초록 |
목적: 전이 잠재능이 높은 간암 HCCLM3 세포주에서 SP(side population) 세포의 비율을 검사한 다음, SP 세포를 분리하여 그 생물학적 특성을 연구 논의하였다. 방법: 4가지 간암 세포주의 전이 잠재능은 HCCLM3 gt;MHCC97H gt;MHCC97L gt;Huh7이었으며 이에 각각 형광염료 Hoechst33342로 염색하며 베라파밀을 첨가한 길항 그룹을 대조군으로 한 다음, 유세포 분석법을 통하여 SP 세포의 비율을 검사하였다. HCCLM3 세포로부터 SP 세포 및 MP(main population) 세포를 분리한 다음, 단일 세포 부유 배양, Transwell 침윤 실험 및 누드 쥐의 종양 형성 실험 등을 통하여 HCCLM3 SP세포가 종양 줄기세포의 생물학적 특성을 가지고 있는지 여부를 판단하였다. RT-PCR법을 통하여 SP 및 MP 세포 내 줄기세포 관련 유전자의 발현을 검사하였다. 결과: HCCLM3 세포에서 SP 세포의 비율은 (16.9±1.8)%로써 MHCC97H, MHCC97L, Huh7에서보다 뚜렷하게 높았다[(8.4±0.7)%, (4.6±0.5)%, (1.0±0.2)%, 모두 P SP 세포에서 구형 부유물의 형성(sphere formation)은 MP 세포에서보다 뚜렷하게 많았으며[(25.3±5.1)% vs(11.2±2.6)%,P HCCLM3 세포의 SP 세포에서 줄기세포 관련 유전자 ABCG2, CD13, CD44, Nanog, Sox2 및 Klf4 mRNA의 평균 발현 수준은 각각 MP 세포의 5.64, 2.26, 2.10, 3.78, 2.37, 2.92배였다(모두 P 결론: 간암 HCCLM3 세포의 SP 세포에는 간암 줄기세포가 농축되어 있으며 이것은 그 높은 전이 잠재능과 상관성이 있다고 본다. |