| 저자(한글) |
ZHANG, Ming,ZHAO, Zhi-Jing,TU, Hui-Hui,SHEN, Wen-Ting,WANG, Xue-Zhong,HU, Guang |
| 초록 |
ADMA(Asymmetric dimethylarginine)는 내원성 일산화질소 합성 효소 억제제로서 심혈관 질병, 당뇨병, 성기능 장애, 신부전 등 여러가지 질병과 밀접한 연관이 있는 위험한 요인이다. 본 논문은 화학 발광법으로 시트룰린 혹은 ADMA가 ArcB와 ArcC와 결합하여 생성한 ATP를 검측하고 이 방법의 민감도와 동적 범위에 대해 평가하였다. 1) 녹농균에서 ArcB와 ArcC를 복제하고, 대장간균 형질을 전환하여 고효율적인 가용성 발현을 실현하였다. 또한 니켈열 친화력으로 정화하여 융합 단백질을 얻었고 TLC 크로마토 그래피와 암모니아의 정량 측정을 통하여 융합 단백질 활성을 검증하였다. 2) 화학 발광법으로 시트룰린 혹은 ADMA가 해당 효소와 결합하여 생성한 산물 ATP를 측정하였고 이 실험을 최적화하였다. 결과, 양자는 모두 conjugate enzyme의 영향을 받아 ATP를 방출하였다. 상응한 기질 농도의 최저 측정한계는 0.1 umol/L이고 측정 결과는 정상적인 생리 혈청의 ADMA 농도에 접근하였으며 이는 정상적인 생리 혈청의 시트룰린 농도보다 현저하게 낮았다. 정상적인 소변 샘플을 테스트한 결과, 이 방법은 실현 가능하며 앞으로 혈청 및 혈장 샘플의 검측에 기반을 마련하였다. |
