Simplification and optimization of the preparation of Escherichia coli extract for cell-free protein expression
기관명 | NDSL |
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저널명 | 生物工程學報 = Chinese journal of biotechnology |
ISSN | 1000-3061, |
ISBN |
저자(한글) | Guo, Xinjuan,Quan, Chunshan,Zhao, Pengchao,Wang, Lina,Fan, Shengdi |
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저자(영문) | |
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소속기관(영문) | |
출판인 | |
간행물 번호 | |
발행연도 | 2013-01-01 |
초록 | 무세포 단백질 발현 시스템(Cell-free protein expression system)은 목표 단백질을 체외에서 발현하는 새로운 기술이자 새로운 방법으로 단백질체학(proteomics), 단백질 구조 및 기능 등 영역의 연구에서 널리 응용된다. 무세포 단백질 발현 시스템에서 세포 추출물을 제조하는 것은 핵심 요소 중의 하나이다. 대장균 세포 추출물을 제조하는 과정에서 원심 분리 속도(centrifugation speed), 예비 배양(preincubation) 및 투석 등의 매개 변수를 고찰하고, 녹색 형광 단백질(green fluorescent protein)을 보고용 단백질(reporter protein)로 하여 세포 추출물을 제조하는 간단한 방법을 얻어낼 수 있다. 상대적으로 낮은 회전 속도(12000×g, 10min)에서 간단한 공부화(brief incubation)로도 활성이 높은 세포 추출물을 제조할 수 있으며, 무세포 시스템의 단백질 발현에 사용할 수 있다. 발현한 녹색 형광 단백질의 생산량은 209 mu;g/mL이다. 전통적인 대장균 세포 추출물 S30과 비교하였을 때, 새로운 방법은 시간 및 원가를 62% 절약할 수 있다. 생산량은 전통적인 방법의 2.6배이며, 조작이 빠르고 유통량이 많은 등 무세포 단백질 발현 기법의 우위를 더욱 명확히 나타낸다. |
원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART67188983 |
첨부파일 |
과학기술표준분류 | |
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ICT 기술분류 | |
DDC 분류 | |
주제어 (키워드) | protein synthesis,cell-free expression system,cell extract,Escherichia coli,in vitro,단백질 발현,무세포 발현 시스템,세포 추출물,대장균,체외 발현 |