| 저자(한글) |
WEI, Chuan-yu,LIU, Yun-hong,PANG, Wei,MENG, Ming-yao,XIE, Yan-hua,XUE, Sha,HOU, Zong-liu |
| 초록 |
인터페론- gamma;, 항CD3 단클론 항체 및 IL-2 체외 유도작용으로 말초혈 단핵세포를 증폭시켜 만들어진 CIK세포를 이용하여 배양전과 배양 시작 후 15일 되었을때 세포 샘플을 얻었다. 배양전후의 세포 증식, 형태 및 표면 표시 변화에 대하여 검측을 진행함과 동시에 총단백질을 추출하여 정량, 2차원 전기 영동(two-dimensional gel electrophoresis) 및 은 염색(silver staining)을 진행하였다. 그리고 ImageMasterTM 소프트웨어를 이용하여 배양전후 동일한 발현단백질 반점과 서로 다른 단백질 반점에 대하여 분석하였으며 그 중에서 24개 단백질 반점을 선택하여 질량분석검측을 진행하였다. 마지막으로 qPCR 기술을 이용하여 배양전후 대표성을 띤 일부분 단백질의 전사 상황에 대하여 분석하였다. 분석 결과, 배양전후 세포의 단백질체학 특징은 완전히 다르고 서로 같은 발현 단백질 반점은 주요하게 유전자의 전사인자 및 세포골력과 관련이 있으며 유도를 진행한 특이성 단백질은 주요하게 세포의 생장 및 증식과 관련이 있다. 전사 및 단백질 수준에서 부분적으로 부적상관현상(negatively correlated)이 나타났다. 그러나 단백질체가 유전자 발현의 최종 형식이기 때문에 단백질 차이연구 결과, 세포인자의 유도를 거친 CIK 세포의 대량적인 확증은 세포내 단백질의 발현 개변과 관련이 있다는 것을 알 수 있다. |
