Research of N Terminal Sequencing Methods for Monoclonal Antibody Pharmaceuticals Blocked by Pyroglutamic Acid
기관명 | NDSL |
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저널명 | 中國生物工程雜誌 = Journal of Chinese biotechnology |
ISSN | 1671-8135, |
ISBN |
저자(한글) | LI, Ming-zhu,HAN, Wei-dong,XING, Guang-hui,TENG, Zhen-lin,XUE, Guo-mei,HOU, Chen-rui,RUAN, Hong-qiang,CHEN, Wei |
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저자(영문) | |
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출판인 | |
간행물 번호 | |
발행연도 | 2013-01-01 |
초록 | 목적 : N말단 서열분석기를 사용하여 피롤리돈카복실산(pyroglutamic acid)에 의해 차단된 항체약물의 N말단 서열을 직접적으로 분석하지 못하는 경우, 피롤리돈카복실산의 제거를 통한 N말단 서열 분석을 목적으로 한다. 기법 : 항체의 중/경연쇄(heavy and light chains) 유전자에 대한 N말단 서열분석을 각각 시도하여 분석이 되지 않을 경우 LC-MSMS를 이용하여 중/경연쇄 유전자 N말단의 피롤리돈카복실산 존재를 확인한다. 피롤리돈카복실산이 존재한다는 것은 곧바로 N말단 유전자 서열 분석이 차단되었음을 의미한다. 피롤리돈카복실산 아미노말단펩티드가수분해효소(pyroglumate aminopeptidase)를 이용하여 항체 단백질의 피롤리돈카복실산을 절단한 후, N말단 서열분석기를 사용하여 Edman 분해법에 의한 N말단 서열분석을 수행하며 항체약물 중/경연쇄 유전자 N말단 아미노산 서열을 획득한다. 결론 : 항체약물 중/경연쇄 유전자 N말단에 대한 N말단 서열분석기 분석 및 LC-MSMS 분석을 통하여 N말단이 피롤리돈카복실산에 의해 차단되었음을 확정한다. 효소절단 처리를 거친 다음, N말단 서열분석기를 사용한 전구간 서열 분석을 통하여 항체약물 N말단 서열이 이론적 서열과 일치함을 검증하였다. |
원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART69976130 |
첨부파일 |
과학기술표준분류 | |
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ICT 기술분류 | |
DDC 분류 | |
주제어 (키워드) | Monoclonal antibody,Pyroglumatic acid blocking,Edman degradation,N terminal sequencing,LC-MSMS,단클론 항체,피롤리돈카복실산에 의한 차단,에드만 분해,N말단 서열분석,LC-MSMS |