| 초록 |
ICE1 유전자는 MYC와 유사한 bHLH 전사 인자를 코딩할 수 있으며, 저온 조건에서 CBF3 프로모터 중의 MYC 작용 인자와 특정적으로 결합하여, CBF3 조절의 하류 유전자 발현을 유도할 수 있고, 식물 역경 스트레스 반응에서 중요한 기능을 갖고 있다. 본 연구는 PCR 증폭 기술을 통하여 Populus simonii × P. nigra 유전체 DNA로부터 1,247 bp의 ICE1 유전자 프로모터 서열을 복제하였다. 온라인 예측 분석 결과, 해당 서열에 전형적인 진핵생물 핵심 프로모터 영역이 있으며, 몇개 TATA-box, CAAT-box 등 기본 시스-작용 인자를 포함한 외, 기타 반응 인자도 존재한다. 예를 들면, ABRE, DOFCOREZM, MYBCORE, W-box와 MYCCONSENSUSATHSE 등이 있는데 이러한 인자는 일부분이 지베렐린(gibberellin), 아브시스산 등 호르몬과 관련되고, 일부는 역경 스트레스 유도와 관련된다. 이는 PnsICE1 유전자 프로모터가 역경 스트레스와 관련되고 Populus simonii × P. nigra의 역경 저항 스트레스의 생리과정에서 중요한 기능을 갖고 있다는 것을 설명한다. 복제하여 얻은 PnsICE1 프로모터로 pBI121 중의 CaMV35S 프로모터를 대체하여 식물 발현 벡터 pBI121-ICEPro를 구축하였으며, PnsICE1 프로모터 촉진 유전자 gus로부터 발현되었고, 또 농간균 매개의 일시적 감염법으로 애기장대를 전환하였다. 일시적 감염 후의 애기장대에 대해 GUS 염색 분석을 진행하였다. 결과적으로 PnsICE1 프로모터의 촉진 조건에서 보고유전자 gus는 꽃 및 뿌리 부분에서 특이발현하였으며, PnsICE1 프로모터는 촉진 활성을 갖고 있다. |
