저자(한글) |
ZHANG, Xiao-jun,BAI, Xue-song,BI, Ke-ran,XU, Jia-tao,QIN, Lei,YAN, Bin-lun |
초록 |
분자생물학적 방법으로 콜레라균(Vibrio cholera) lolB를 목표유전자로 하는 특이성 프라이머를 설계하고, 콜레라균의 PCR과 고리매개 등온증폭(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP) 측정 기술을 연구하였으며, 이들의 특이성, 민감성 및 실제응용을 비교하였다. 그 결과, PCR을 이용한 콜레라균 측정 방법의 검출 한계는 4.0×10 3 CFU/ml이다. LAMP 측정 방법은 65℃에서 60분간 항온 증폭하고, 검출 한계는 4.0×10 1 CFU/ml이며, 반응물에 형광염료 SYBR Green I를 첨가한 반응액은 현저한 녹색이다. 에로모나스소브리아(Aeromonas sobria), 장염비브리오(Vibrio parahaemolyticus), 비브리오 앵길라룸(Vibrio anguillarum) 및 Vibrio damsela을 대조균으로 한 측정 결과는 음성이다. 콜레라균 인공감염의 8가지 수산품에 대한 PCR과 LAMP 측정 결과는 모두 양성이며, 감염되지 않은 대조조는 음성이다. PCR과 LAMP을 이용한 콜레라균 측정 방법은 모두 민감도가 높고 특이성이 강한 장점을 가지며, LAMP을 이용한 콜레리균 측정 방법의 민감도는 PCR 방법의 100배로서, 양식현장에서의 측정에 더 적합하다. |