| 저자(한글) |
ZHU, Yan,ZHANG, Fu-chun,MA, Ji,HUANG, Li-na,LIU, Xiao-ning |
| 초록 |
유전체 전기 주입법(gene electro injection)으로 생쥐의 왕담배나방(Helicoverpa armigera) FK50 결합 단백질(FK506 binding protein, FKBP12) 저항성 다클론 항체를 제조하였다. 그리고 웨스턴 블롯법(Western blot)으로 항체와 항원의 특이적 결합 현황을 검증하였다. 재조합 플라스미드 pcDNA3-FKBP12를 구축하였다. 그리고 서열 측정 방법으로 서열의 정확성을 검증하였으며, 유전자 주입법으로 재조합 플라스미드 pcDNA3-FKBP12를 생쥐 체내에 주입하여 4차 면역한 후 ELISA 검사법으로 항체의 역가(potency)를 확정하였으며, 웨스턴 블롯법 및 면역조직 화학법(immunohistochemical technique)으로 항체의 특이적 결합 현황을 검사하였다. 연구 결과, 생쥐 FK506 결합 단백질 저항성 혈청의 역가는 1:25,600에 도달하였으며, 웨스턴 블롯법으로 검사한 결과, 해당 저항성 혈청은 융합 단백질 His-FKBP12와 융합될 수 있었으며, 면역조직 화학법으로 검사한 결과 3령 왕담배나방 유충의 서로 다른 조직에서 FKBP12는 모두 발현되었다. 유전체 전기 주입법으로 제조한 생쥐 FK506 결합 단백질 저항성 항체는 역가와 특이적 결합 측면에서 모두 기대 효과에 도달하였다. |
