저자(한글) |
WU, Bo,CHAO, Nai-xia,ZHAO, Fei-lan,LI, Jin-ping,CHEN, Li,CHEN, De-feng,HUANG, Tian-ming,MO, Fa-rong,ZHANG, Qi-hui,LUO, Guo-rong |
초록 |
GCF2는 전사 억제인자이다. 간암세포 BEL-7404 이동에서의 GCF2 단백질 역할을 연구하고 칩 결과에 따라 세포 이동 조절에 참여하는 GCF2의 표적 유전자를 검증하기 위하여, 본 논문에서는 siRNA(짧은 간섭 RNA)를 이용하여 GCF2 단백질 발현을 침묵(silence)시켰으며, 다음으로 transwell 실험을 통하여 GCF2 침묵 전후에 BEL-7404 세포 이동의 변화를 검사하였다. 마지막으로 형광 정량 RT-PCR 및 Western blot 방법을 사용하여 칩 결과에서 이동 관련 유전자의 발현을 검증하였다. 연구 결과에 따라 siRNA에 의한 GCF2 간섭에 성공한 후 이동 실험을 진행하였다. siRNA-GCF2 그룹, FAM-siRNA-NC 그룹, 리포좀(liposome) 그룹 및 처리하지 않는 야생형 BEL-7404 그룹에서는 24시간 후에 8 μm 미세공막(microporous membrane)을 거친 세포 수량( - x±s)이 각각 41.66±1.52, 41.66±1.15, 41.33±1.5, 18.66±0.577이었으며, 차이는 통계학적 의의를 가지고 있다(p QRT-PCR 방법을 사용하여 9개 후보 유전자를 검증한 결과, MyD88이 siRNA-GCF2 그룹에서의 발현은 기타 3그룹보다 선명하게 높았다(p 또 Western blot 방법에 따른 검사 결과, siRNA에 의한 GCF2 간섭 후 간암세포 BEL-7404의 MyD88 단백질 발현이 기타 3그룹보다 뚜렷하게 높았다(p 결론적으로, siRNA에 의한 전사 인자 GCF2 단백질 발현의 침묵은 종양 세포 BEL-7404의 이동을 억제할 수 있다. 이로써 GCF2가 전사 인자로서 표적 유전자 MyD88 발현에 대한 억제를 통하여 세포 이동에 참여할 수 있는 것으로 추정되었다. |