초록 |
목적: Chemo-resistance protein으로 알려진 clusterin의 항암약제와의 결합력 및 약제 내성과의 연관성을 분석하여 그 작용기전을 알아본다. 방법: 항암제를 coating buffer에 희석하여 96 well plate에 피막 시킨 후 정제된 clusterin과 반응시킨 후 세척하여 잉여 clusterin 을 제거시키고 mouse monoclonal human clusterin antibody와 peroxidase가 결합된 2차 항체를 붙여 측정한 Optical density (OD) 값으로 정량화하여 비교한다. 각각의 항암제와 clusterin간의 결합 정도가 항암제 내성과 연관성이 있는지 알아보기 위하여 Western blotting으로 clusterin 분비가 거의 없는 것으로 확인된 난소암 세포주 SKOV-3에 항암제를 단독으로 투여한 경우와 항암제와 clusterin을 동시 투여한 군 간의 난소암 세포주 SKOV-3의 생존율을 XTT를 이용하여 비교하였다. 결과: ELISA검사를 통한 결합력 검사에서 paclitaxel, cisplatin, carboplatin, topotecan, adriamycin, Etoposide, 5-Fluorouracil (5-FU) 등은 O.D. ratio가 각각 2.34, 2.40, 0.52, 2.44, 1.602, 1.14, 1.13으로 Topotecan, cisplatin, paclitaxel 등에서 높은 결합력을 보였다. 또한 이들 약제를 SKOV-3에 clusterin과 처치하였을 경우 항암내성이 증가되었다 (P |