| 저자(한글) |
ZHU, Liang-quan,WANG, Fang,WU, Jing,FENG, Yu,ZHANG, Jin-ya,WANG, Nan,ZHU, Hong-fei,DING, Jia-bo |
| 초록 |
[목적] 서로 다른 불활성화 방법이 브루셀라(Brucella) 불활성화(Inactivation)에 대한 효과를 비교하고 불활성화 매개변수(Parameters)를 확정하였으며 브루셀라 불활성화 항원(antigen)의 제조에 참조를 제공하였다. [방법] 4주의 브루셀라 악성 참고 균주(virulent reference strains) 2308(B. abortus), M28(B. melitensis), S1330(B. suis) 및 16M(B. melitensis)는 각각 TSA 배지(medium)에서 배양 및 번식을 진행한 다음 생리적 식염수(physiological saline)로 (4-8)×10 10 CFU/mL의 세균 현탁액(bacterial suspension)을 만들었다. 해당 현탁액을 2등분 하여 80℃ 조건에서 서로 다른 시간 동안 불활성화를 진행하고 그 외에 같은 농도의 세균 현탁액을 서로 다른 농도의 포름알데히드(Formaldehyde)를 사용한 37℃ 조건에서 서로 다른 시간 동안 불활성화를 진행하였으며 불활성화 점검을 통하여 불활성화 효과를 확정하였다. 포름알데히드와 열 불활성화를 거친 16M 항원을 선택하여 2마리의 1.5-2.0kg 토끼 피하(subcutaneous)에 1×10 10 CFU/mL 용량의 해당 항원을 접종하고 6주 동안 로즈 벵갈 시험(RBT, Rose Bengal test)과 시험관 혈청 응집 시험(SAT, Serum agglutination test)으로 매주 채혈을 진행하여 항체 효과를 측정하였다. [결과] 80℃, 5min 조건에서 2308, S1330과 16M 등 3가지 균주는 불활성화를 진행할 수 있고 80℃, 10min 조건에서 4가지 균주 모두 불활성화를 진행할 수 있다. 0.2%의 포름알데히드로 7d 동안 불활성화를 진행한 결과, 4가지 시험 균주에 대해 완전히 불활성화를 진행할 수 없고 0.4%의 포름알데히드는 12h 내에 16M에 대해서만 불활성화를 진행하며 72h 동안 M28에 대해 불활성화를 진행할 수 있고 0.4%의 포름알데히드로 2308과 S1330에 대해 불활성화를 진행한 결과는 차이가 비교적 크다. 0.6%의 포름알데히드는 72h 내에 4가지 시험 균주에 대해 불활성화를 진행할 수 있다. 서로 다른 방법으로 불활성화를 진행한 16M 항원으로 토끼에 대해 면역 반응을 진행한 후 혈청 항체 로즈 벵갈 응집과 시험관 혈청 응집 효과의 성장 및 감소 추세(the growth and decline trend)는 일치하고 포름알데히드로 불활성화를 진행한 항원의 면역 원성(immunogenicity)은 열 불활성화 항원보다 조금 높다. [결론] 80℃ 열 불활성화와 0.6%의 포름알데히드 불활성화는 모두 브루셀라의 불활성화에 사용할 수 있고 브루셀라의 면역 원성에 영향을 미치지 않는다. |
