| 저자(한글) |
LIN, Hong,HUANG, Jian-zhong,SHU, Zheng-yu,LIU, Yan-ru,WU, Hai-long,LI, Xin,JIANG, Xian-zhang,YE, Fei,ZHENG, Zhen-fen,LIN, Yue-xin |
| 초록 |
【목적】Burkholderia sp. ZYB002 균주 중의 신형 리파아제 lipC24 유전자를 콜로닝하고, 그 기본 효소학적 성질을 측정하여 균주 내 해당 유전자의 생리적 기능에 관한 후속 연구에 기반을 마련하고자 한다. 【방법】Burkholderia cepacia JK321 균주의 전 유전체 DNA 정보에 근거하여 직접 프라이머를 설계하였으며, Burkholderia sp. ZYB002 균주의 유전체에서 lipC24 유전자를 증폭시킨 후, 이에 대한 원핵 발현을 진행하고 재조합 단백질을 정제하였으며, 효소학적 성질을 분석하였다. 【결과】lipC24 유전자의 전체 길이는 1,317 bp였으며, 438개 아미노산 잔기를 코딩할 수 있었다. 폴리펩티드 사슬에는 보수적인 펜타펩티드-G-X 1 -S-X 2 -G-서열이 있었다. 재조합 단백질 LipC24의 분자량은 45 kDa였다. 다양한 4-니트로페닐에스테르(4-nitrophenyl ester)를 가수분해 할 수 있었으며, 중간사슬 지방산의 4-니트로페닐에스테르를 선호하였다. 그 촉매 가수분해 반응에 필요한 최적의 온도는 40℃, 최적의 pH는 7.5였다. 40℃ 환경에서 반감기는 15.72분이었으며, pH 7.0-8.0일 때, 비교적 양호한 안정성을 나타냈다. 【결론】lipC24의 코딩 산물은 하나의 45 kDa인 단백질로 뚜렷한 리파아제 활성을 갖고 있었으며, 중온성 및 중성 리파아제에 속하였다. |
