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논문 기본정보
Expression of Arabidopsis thaliana thioesterase gene in Pichia pastoris
논문 개요
| 기관명 | NDSL |
|---|---|
| 저널명 | 生物工程學報 = Chinese journal of biotechnology |
| ISSN | 1000-3061, |
| ISBN |
논문저자 및 소속기관 정보
| 저자(한글) | HAO, Zhao-cheng,WANG, Teng-fei,LI, Zhong-kui,HAO, Zi-kai,DAI, Kun,WANG, Rui-ming |
|---|---|
| 저자(영문) | |
| 소속기관 | |
| 소속기관(영문) | |
| 출판인 | |
| 간행물 번호 | |
| 발행연도 | 2015-01-01 |
| 초록 | 싸이오에스테라아제(thioesterase)는 생물체 내에서 아실기 그룹(Acyl group) 벡터 단백질과 포화성 지방의 아실기 사슬을 촉매화하여 가수분해할 수 있으며, 중쇄 지방산(Medium chain fatty acids, MCFAs)의 축적에 대해 핵심 역할을 한다. 생산 가운데서 중쇄 지방산의 생산 능력을 가진 공정균을 얻기 위해, 애기장대(Arabidopsis thaliana) cDNA를 주형(template)으로 하고 PCR 증폭을 통하여 아실기-ACP 싸이오에스테라아제 유전자 AtFatA를 얻었다. EcoRⅠ/XbaⅠ 이중 효소 절단 후, 동일한 효소 절단의 플라스미드에 연결하여 재조합 플라스미드 pPICZαA-AtFat를 얻었다. 전기 충격법으로 재조합플라스미드를 피치아 효모 GSl15에 형질전환하였다. Zeocin 항성 선별을 통하여 양성 클론을 선택하고 진탕 발효 유도를 수행하였다. SDS-폴리아크릴아미드(polyacrylamide gel) 분석을 통하여 뚜렷한 단백질 밴드를 얻었으며, 최초로 AtFatA의 진균 발현 시스템을 구축하는데 성공했다. 가스크로마토그래피-질량분석법(gas chromatography-mass speetrometry method, GC-MS)으로 발효 산물의 세포외 유리 지방산을 검측하였다. 그 결과피치아 효모 AtFat 재조합균주의 세포외 유리된 MCFAs(주로 옥탄산) 생산량이 GSll5 시작 균주에서보다 51% 증가하였으며, MCFAs 생산량이 세포외 총 지방산 산량의 28.7%를 차지하였다. 그러나 야생 균주에서는 상술한 비례가 18.1%밖에 되지 않았다. 본 연구 결과는 앞으로 안전한 유기농 MCFAs를 생산하는데 새로운 경로를 탐색하였다. |
| 원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART72513943 |
| 첨부파일 |
추가정보
| 과학기술표준분류 | |
|---|---|
| ICT 기술분류 | |
| DDC 분류 | |
| 주제어 (키워드) | Arabidopsis thaliana,acyl-ACP thioesterase,Pichia pastoris,genic recombination expression,free mediumchain fatty acids,extracellular,애기장대,아실-ACP 싸이오에스테라아제,피치아 효모,유전자 재조합 발현,유리 중쇄 지방산,세포외 |