| 저자(한글) |
CHEN, Yun,YANG, Xue-li,ZHOU, Hai-yan,HUANG, Chao,WANG, Wen-long,GONG, Xiao-hai,FENG, Bai-nian,JIN, Jian |
| 초록 |
PARP-1 체외 활성의 측정 기법으로 84개의 PARP 잠재적 억제 활성이 있는 화합물을 선별하였다. Sf9 곤충 세포에서 효소액을 추출하고 NAD + 를 기질로, DNA를 활성제로 하여 PARP-1 활성의 측정법을 구축하였다; 고속대량 측정기술의 매개변수로 이 기법을 평가하고, 이미 입증된 PARP 억제제를 사용하여 감정하였다. 또한 이 기법으로 PARP 억제제(inhibitors)를 선별하였다. 실험 결과, 확인된 효소 촉매 반응 시스템: 12.5 nmol/L NAD + , 15 μg/m L DNA, 6.25×10 -4 U PARP-1이다. 평가 Z' 인자가 0.76이고 S/B 값이 3.58이다. 해당 모델 기반의 47개 선별 화합물의 농도가 7.4 μmol/L일 때, PARP-1에 대한 억제율이 60% 이상에 달했다. 구축한 PARP-1 활성 측정법을 PARP-1 억제제의 고속대량 선별(high-throughput screening)에 적용할 수 있다는 것을 설명한다. |
