저자(한글) |
WANG, Cai-yun,LI, Fu-sheng,LI, Tao,LI, Cai-xia,ZHANG, Xiao-dong,WANG, Yuan-zhong |
초록 |
HMA 단백질 (heavy metaltransporting ATPase)은 식물에 광범위하게 존재하는 다기능성 단백질이다. 본 실험은 용담(Gentiana rigescens)의 전사 그룹 GrHMA 유전자 서열에 근거하여 특이성 프라이머를 설계하고 RT-PCR을 통하여 GrHMA 유전자 서열을 증폭하였다. 그리고 TA 복제, 서열 측정 및 서열 분석을 실행하였다; 원핵 발현 백터 pGEX-4T-1-GrHMA를 구축하고 E. coliRosetta (DE3)에 형질전환하였으며 37℃, 1.0 mmol/LIPTG 조건에서 성공적으로 유도하여 발현시켰다. 서열 분석 결과, GrHMA 유전자는 HMA 슈퍼패밀리의 성원이었다; GrHMA 아미노산 서열 계통 발육 분석 결과, GrHMA와 TcHMA이 같은 계통군에 있었다. SDS-PAGE 분석 결과, 발현된 단백질의 크기가 예측한 단백질의 크기가 일치하였다. 해당 결과는 GrHMA 단백질을 심층적으로 정제하고 단백질 구조와 기능을 연구하는데 기반를 마련하였다. |