저자(한글) |
JIN, Liang,WANG, Hong-xiu,LIU, Jin-jin,WANG, Jin-chang,ZHANG, Li-li,YANG, Gang,ZHANG, Xiao-hua,ZHENG, Guo-hua |
초록 |
세포질 다각체병 바이러스(cytoplasmic polyhedrosis virus)의 비리온 구조 단백질(virion structural proteins)은 캡시드 단백질 VP1(Capsid protein, CP), 터릿 단백질 VP3(Turret protein, TP), 대형 돌출 단백질 VP5(Large protrusion protein, LPP)로 구성이 되며 이 3가지 단백질은 바이러스 게놈 단편 S1, S4, S7에 의해 인코딩된다. 면역학적 방법을 사용하여 세포질 다각체병 바이러스 구조 단백질의 위치를 확인하기 위해 마미송 솔나방 유충 세포질 다각체병 바이러스 후난균주(Hunan strain)에서 바이러스 핵산을 추출하고 S1, S4, S7 단편을 회수 및 정제한 다음 RT-PCR 증폭을 통해 대응 단편의 ORF 전구간 단편, 항원 도메인 단편을 획득한다. 그 다음 원핵 발현 벡터에 복제하고 대장균 BL21 균주에서 발현시킨다. 그리고 집토끼에 면역접종하여 다클론 항체를 제작한다. Western blot 분석 결과 DpCPV 게놈의 S1, S4, S7 단편(segment)은 구조 단백질 VP1, VP3, VP5를 각각 인코딩하는 것으로 나타났고 이는 추측 결과와 일치하였다. 면역콜로이드금(immune colloidal gold) 방법을 통해 S1, S4, S7에 의해 인코딩된 단백질은 비리온 캡시드 표면(virions capsid surface)에 위치한다는 것을 입증하였다. 본 연구는 면역학적 방법을 사용하여 세포질 다각체병 바이러스 구조 단백질은 비리온 표면에 위치하는 것을 처음으로 확인하였고 세포질 다각체병 바이러스 구조 단백질의 기능 및 침습 메커니즘 연구에 면역학적 기반을 마련하였다. 본 연구는 세포질 다각체병 바이러스 연구에 중요한 의미가 있다. |