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논문 기본정보
Expression and Characterization of ThMSD from Thellungiella halophila in Escherichia coli
논문 개요
| 기관명 | NDSL |
|---|---|
| 저널명 | 中國生物工程雜誌 = Journal of Chinese biotechnology |
| ISSN | 1671-8135, |
| ISBN |
논문저자 및 소속기관 정보
| 저자(한글) | XU, Xiao-jing,AN, Hui-ling,CHEN, Ning-mei,YANG, Jing,ZHOU, Yi-jun |
|---|---|
| 저자(영문) | |
| 소속기관 | |
| 소속기관(영문) | |
| 출판인 | |
| 간행물 번호 | |
| 발행연도 | 2013-01-01 |
| 초록 | 과산화물 제거효소(Superoxide dismutases, SODs)는 진핵생물에서 광범위하게 존재하는 금속함유의 항산화효소 이다. 여기에는 Cu/Zn-SOD, Mn-SOD, Fe-SOD 이 세가지도 포함한다. 식물 미토콘드리아의 Mn-SOD는 식물 스트레스 저항력에서 중요한 작용을 발휘한다. ThMSD는 극도의 스트레스 저항성식물 Thellungiella halophila에서 클로닝한 Mn-SOD 인코딩 유전자이다. ThMSD를 원핵발현벡터 pET30a(+)에 연결한다. 다음 BL21에 형질전환하여 재조합 균 BL21(pET30a-ThMSD)를 얻는다. SDS-PAGE 분석결과 재조합 균은 32kDa에서 선명한 유도밴드가 있는데 이는 이론크기와 일치하다. Western blotting 분석결과 유도한 밴드는 항His 태그의 단일클론항체와 특이성 반응을 일으킨다. 3개 재조합 균주의 용해성 총단백질에 대한 SOD활성분율 분석을 한 결과 공백(blank) 대조균보다 모두 높다. 대량으로 ThMSD를 발현하는 재조합 균주를 선택하여 대량적인 유도발현을 한다. 니켈(Ni) 친화성 크로마토그래피법으로 목적단백질을 정화한다. 정화한 ThMSD 재조합 단백질에 대해 열의 안전성 분석을 한다. 그 결과 55℃에서 ThMSD는 여전히 50%이상의 활성이 있고 42℃로 40분 처리후 여전히 60%이상의 활성을 유지할 수 있다. 재조합 균 BL21(pET30a-ThMSD)이 NaCl 저항성분석 실험에서 배지의 농도가 정상수치보다 높을때 측정단계에 있는 재조합 균의 생장속도는 대조균보다 높다. 그러므로 원핵발현의 재조합 단백질 ThMSD는 강한 SOD활성 및 열 안정성이 있으며 ThMSD유전자를 발현하는 BL21균주는 NaCl에 대한 내성을 높였다. 이로써 Thellungiella halophila ThMSD 유전자는 Thellungiella halophila의 강한 스트레스 저항력과 밀접한 연관성이 있다는 것을 추측할 수 있다. |
| 원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART69976044 |
| 첨부파일 |
추가정보
| 과학기술표준분류 | |
|---|---|
| ICT 기술분류 | |
| DDC 분류 | |
| 주제어 (키워드) | Thellungiella halophila,ThMSD,Prokaryotic expression,Thermal stability,NaCl tolerance,Thellungiella halophila,ThMSD,원핵 발현,열 안전성,NaCl 항성 |