| 시설장비 설명 |
특징 Real time PCR법은 PCR 증폭량을 실시간으로 확인하면서 해석하는 방법으로 전기영동이 필요없이 신속하게 정량할 수 있다. Serial dilution한 양을 알고 있는 DNA를 표준으로 PCR반응을 실시한다(그림 2-A). 이를 기본으로 증폭이 지수적으로 일어나는 영역에서 일정 증폭산물량이 되는 cycler수(threshold cycle; Ct값)를 가로축에, 초기 DNA량을 세로축에 plot하여 검량선을 작성한다(그림 2-B). 미지농도 시료도 같은 조건 하에서 반응하여 Ct값을 구하여 목적 DNA량을 측정한다.통상 real time PCR은 형광시약을 사용한다. 구성및성능 Real time PCR을 위해서는 thermal cycler와 분광형광광도계를 일체화한 장치(예를 들면 Smart Cycler® System(TaKaRa Code SC100)). 활용분야 처리군과 대조군 쥐의 뇌에서 RNA 를 추출 후 특정 유전자의 발현 증감 여부를 실시간으로 조사한다. |
