| 시설장비 설명 |
Real-time PCR(Polymerase chain reaction) 은 thermal cycler와 분광 형광 광도계가 일체화된 장치로, 실시간으로 PCR 증폭산물의 생성과정을 모니터링하여 target DNA의 양을 분석하는 장비이다. Real-time PCR은 PCR 증폭 산물의 확인을 위한 전기 영동이 필요 없으며, 증폭이 지수함수적으로 일어나는 영역에서 증폭 산물량을 비교하여 보다 정확한 정량이 가능한 신속성 과 정량성이 뛰어난 방법이다. 기존의 PCR법에 비해서 다음과 같은 잇점을 갖고 있다. 1. DNA와 RNA의 정확한 정량이 가능하다. 2. 전기영동이 필요 없어 신속하고 간편하게 해석할 수 있으며, 오염의 위험성이 적다. Real time PCR은 PCR증폭산물을 형광을 통해 검출한다. 검출방법에는 크게 Interchelating법 (SYBR Green)과 Taqman probe법, cycling probe법등이 있다. Interchelating법은 double strand DNA를 모두 검출하기 때문에 유전자별로 probe를 준비할 필요가 없어 저렴한 비용으로 반응계를 구축할 수 있다는 장점이 있는 반면 검출 특이성은 그다지 높지 않다. 형광표식 probe의 경우 비용은 많이 들지만 검출특이성이 높다는 장점이 있다. |
