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장비 및 시설 기본정보
동결 절편기
장비 개요
| 기관명 | ZEUS |
|---|---|
| 장비번호 | |
| 제작사 | Thermo Scientific |
| 모델명 | HM550M |
| 장비사양 | |
| 취득일자 | 2006-06-07 |
| 취득금액 |
보유기관 및 이용정보
| 보유기관명 | 아주대학교 산학협력단 |
|---|---|
| 보유기관코드 | |
| 활용범위 | |
| 활용상태 | |
| 표준코드 | B107 |
| 표준분류명 | |
| 시설장비 설명 | 동결절편 표본이라고 하는 것은 동결시킨 표본을 cryostat로 절편하여 제작 한 것이다. 이 경우의 표본은 채취한 재료(장기 또는 시료)를 동결조직 포매 제(OCT compound)로 감싸 동결시킨 것이며 cryostat는 -10~-40℃정도 의 저온도하에서 microtome에 의한 미세 절단을 가능하게 하는 기계이다.ㆍ동결용 포매제(OCT compound 등) ㆍ동결용 액체질소 또는 드라이아이스·에탄올(드라이아이스·아세톤) ㆍ고정이 필요한 경우: 고정액(10% formaline 4% paraformaldehyde 등) ㆍ고정이 필요한 경우: Sucrose ㆍPBS(인산 완충생리식염수) ㆍ동결용 포매접시（없으면 대신 알미늄 호일 등으로 접시를 제작해도 된다.) ㆍSlide glass(silane 등의 코딩 slide가 좋다.) ㆍ염색바구니(slide를 세우는데 필요) ㆍCryostat(라이커사 브라이트사 등) ㆍDryer(냉풍건조용)① 통상의 염색(HE Azan·Mallory 염색 등) 고정액은 통상 10% formaline을 사용하여 절편의 두께는 4~6 ㎛로 한다. 아세톤과 알코올계의 고정액으로 고정한 경우에는 formaline계의 고정액으 로 고정을 한 조직과 비교하면 완성색조가 조금 바뀌게 된다. ② 지방염색(Zudan염색 oil red O 염색 등) 고정액은 통상 10% formaline을 사용하며 알코올계의 고정액은 지방성분이 용출하므로 사용하지 않도록 한다. 최종적으로 탈수ㆍ투철 작업도 하지 않는 다. 염색 후는 수용성 투입제로 투입한다. ③ 면역조직 화학염색(형광항체법 효소항체법) 고정액은 4% PFA 혹은 아세톤을 사용한다. 기고정 동결절편이나 신선 동결 절편 모두 우선은 4% PFA를 시도해본다. 염색작업시간이 길기 때문에 박리 방지를 위해서 silane 등의 코딩 slide를 사용하는 것이 좋다. ④ In situ hybridization (DNA RNA) 고정액은 4% PFA로 사용한다. 표적이 DNA일 경우는 통상과 같이 취급해 도 관계없으나 표적이 mRNA일 경우는 주의해야 한다. RNA를 취급하는 방법은 RNase free의 조건하에서 작업을 해야 한다(장갑과 마스크를 착용하 고 가능하면 RNase의 contamination을 방지할 수 있도록 한다). RNA의 경우에는 표본 제작시에 사용하는 기구류는 가능한 한 건열멸균 혹은 DEPC로 처리한다. 시약류는 RNase free water를 사용하여 조제하며 절편 의 두께는 5~10 ㎛면 된다. 염색 작업시간이 길기 때문에 박리방지를 위해 서 코딩 slide를 사용하는 것이 좋다. ⑤ LCM (LeatherㆍCaptureㆍMicrodisection) 세포를 보충할 필요가 있으므로 코팅하지 않은 slide를 사용해야 한다.(코팅 slide로는 접착력이 너무 강하여 세포를 채취할 수 없다). 신선 동결절편을 코팅하지 않은 slide 에 붙여서 LCM을 하면 양호한 결과를 얻을 수 있다. 또 박절·부착후의 강제건조는 절대로 피해야 한다. 절편의 두께는 8 ㎛정도가 좋다. 4 ㎛이하의 초박절편은 세포 내용물(mRNA)이 유출된다. |
| 장비이미지코드 | http://nfec.ntis.go.kr/storage/images/equip/photo/201308/.thumb/2013080810825756.jpg |
| 장비위치주소 | 경기 수원시 영통구 원천동 아주대학교 1-1 아주대학교 (구)뉴로테크 2층 |
| NFEC 등록번호 | NFEC-2013-08-181780 |
| 예약방법 | |
| 카타로그 URL | |
| 메뉴얼 URL | |
| 원문 URL | http://www.zeus.go.kr/equip/read?equipId=Z-NTIS-0038921 |
| 첨부파일 |
추가정보
| 과학기술표준분류 | |
|---|---|
| ICT 기술분류 | |
| 주제어 (키워드) |